婴幼儿是具有特殊营养需求的一类群体，由于其自身代谢系统尚未完善，营养的摄入需求全面均衡。婴幼儿配方奶粉的主要原料为生乳及精炼植物油等，其中的脂肪含量高达 25 %一 31 % ，包括脂肪酸和少量的反式脂肪酸（ TFAs ）。植物油在加工和使用过程中很容易发生氢化产生 TFA 。有研究表明，长期食用含有TFAs的奶粉，不仅会干扰婴幼儿对必需脂肪酸的吸收，还会造成婴幼儿中枢神经系统发育障碍。因此，国际食品法典委员会（ CAC ) 对婴幼儿配方食品中的下TFAs含量的限定规定为不超过总脂肪酸的 3%（质量分数）；从 2010 年起，我国也对婴幼儿配方食品作出了同样的规定。
本实验主要参考GB 5413.36-2010《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中反式脂肪酸的测定》，建立的方法简单快捷，可以满足奶粉中脂肪酸和反式脂肪酸的日常检测，为奶粉中脂肪酸的营养安全研究工作提供支持，同时对其他样品中脂肪酸和TFAs的同时检测提供参考。
样品前的处理
1.称取5.0g婴配奶粉样品，在乙醇 2mL、水 4mL和氨水20mL的介质中， 于80℃的恒温水浴中振荡水解 4Omin ，每间隔 5min 振荡一次。
2.水解完成后冷却至室温，并在水解混合物中加入乙醇 10mL 混匀。用体积比为 1 : 1 的乙醚一石油醚混合液 30mL 振荡提取10min ，离心5min ，收集醚层提取液，留存于烧瓶中。
3.再用乙醚一石油醚按相同步骤重复提取两次，所收集的醚层提取液合并旋转蒸发至干，所得残留物即为从样品提取所得脂肪总量。
4.取此提取所得脂肪60.0mg，溶解于异辛烷 4mL中，再加入2mol / L 氢氧化钾一甲醇溶液200μL，振荡 lmin ，静置至澄清，使脂肪酸甲酯化。
5.加入硫酸氢钠 1g 中和氢氧化钾，离心5min。取上层溶液按仪器工作条件进行分析测定。
色谱条件
色谱柱：SP-2560 毛细管柱100m×0.25mm×0.2μm(货号: 24056)
进样口：250℃
检测（FID）：260℃
柱温箱：初始温度为：140℃，保持3min；然后以4℃/min的速率升温至180℃，保持5min;再以 1℃/min的速率升温至200℃，保持5min；最后以4℃/min的速率升温至240℃保持10min。
分流比：25：1
流速：1.0mL/min
标准品：Supelco® 37种脂肪酸甲酯混标
（货号: CRM47885）
实验谱图
1 - 丁酸甲酯；
2 - 己酸甲酯；
3 - 辛酸甲酯；
4 - 癸酸甲酯；
5 - 十一碳酸甲酯；
6 - 月桂酸甲酯；
7 - 十三碳酸甲酯；
8 - 豆蔻酸甲酯；
9 - 顺-９-十四碳烯酸甲酯；
10 - 十五碳酸甲酯；
11 - 顺-10-十五碳烯酸甲酯；
12 - 棕榈酸甲酯；
13 - 顺-9-十六碳烯酸甲酯；
14 - 十七碳酸甲酯；
15 - 顺-10-十七碳烯酸甲酯；
16 - 硬脂酸甲酯；
17 - 反-9-十八碳烯酸甲酯；
18 - 油酸甲酯；
19 - 反，反-9,12-十八碳二烯酸甲酯；
20 - 顺，顺-９,12-十八碳二烯酸甲酯；
21 - 花生酸甲酯；
22 - 顺，顺，顺－６,９,12 -十八碳三烯酸甲酯；
23－顺-11-二十碳烯酸甲酯；
24－ 顺，顺，顺－９,12-15-十八碳三烯酸甲酯；
25 - 二十一烷酸甲酯；
26 - 二十碳二烯酸甲酯；
27 - 山嵛酸甲酯；
28 - 顺－８,11,14－二十碳三烯酸甲酯；
29 - 顺-13-二十二碳一烯酸甲酯；
30 – 顺-11,14,17-二十碳三烯酸甲酯；
31 - 花生四烯酸甲酯；
32 - 二十三烷酸甲酯；
33 - 二十二碳二烯酸甲酯；
34 - 二十四烷酸甲酯；
35 - 二十碳五烯酸甲酯；
36 - 二十四碳烯酸甲酯；
37 - 二十二碳六烯酸甲酯
1- 反-9-十六碳烯酸甲酯；
2- 2- 反-6-十八碳烯酸甲酯；
3- 反-9-十八碳烯酸甲酯；
4- 4- 反-11-十八碳烯酸甲酯；
5- 反亚油酸甲酯；
6- 6- 反-10-顺-12-十八碳二烯酸甲酯；
7- 反-9,12,15-十八碳三烯酸甲酯；
8- 反-9,12–顺-15-十八碳三烯酸甲酯
9- 反-9-顺-12-反-15-十八碳三烯酸甲酯；
10- 顺–9–反–12, 15-十八碳三烯酸甲酯；
11- 顺-9-反-12-顺-15-十八碳三烯酸甲酯；
12-反-9-顺-9-反-12-顺-15-十八碳三烯酸甲酯；
13- 反-9-顺-12,15-十八碳三烯酸甲酯；
14– 反-11-二十碳烯酸甲酯；
15- 反-13-二十二碳烯酸甲酯
1-反-9-十六碳烯酸甲酯；
(2+3+4) - (反-6-十八碳烯酸甲酯 +
反-9-十八碳烯酸甲酯 +
反-11-十八碳烯酸甲酯)5- 反亚油酸甲酯；
8- 反-9,12–顺-15-十八碳三烯酸甲酯；
9- 反-9-顺-12-反-15-十八碳三烯酸甲酯；
10- 顺–9–反–12, 15-十八碳三烯酸甲酯
(11+12) – (顺-9,12-反-15-十八碳三烯酸甲酯 +
反-9-顺-12-反-15-十八碳三烯酸甲酯 )
(7+13+14)- 反-9,12,15-十八碳三烯酸甲酯 +
反-9-顺-12,15-十八碳三烯酸甲酯 +
反-11-二十碳烯酸甲酯6- 反-10-顺-12-十八碳二烯酸甲酯；
16-反-13-二十二碳烯酸甲酯
总结
如图，所测定的15种反式脂肪酸甲酯分别在一定的质量浓度内与相应的峰面积之间呈线性关系，其检出限(3S/N) 为 0.42~1.45mg/L。按标准加入法测得的回收率75.5％～107％，测定值的相对标准偏差（n=5）在1.1％～8.5％之间。脂肪酸采用面积归一化法测定，按此方法分析了婴儿奶粉，其中饱和脂肪酸含量在50％以上，反式脂肪酸含量均小于0.5％，均符合国家标准规定。
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产品 | 描述 | 货号 |
气相色谱柱 | SP-2560毛细管色谱柱（100m×0.25mm×0.2μm） | 24056 |
标准品 | 37种脂肪酸甲酯混标认证 参考物质 | CRM47885 |
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