硫乙醇酸盐培养基,也被称为硫乙醇酸盐流体培养基(Fluid Thioglycollate Medium,简称FTM)或液体硫乙醇酸盐培养基(FTG培养基),是一种广泛应用于微生物学领域的培养基。以下是对硫乙醇酸盐培养基的详细介绍:
一、主要成分
硫乙醇酸盐培养基的主要成分包括胰酪蛋白胨、酵母浸出粉、葡萄糖、氯化钠、L-胱氨酸(半胱氨酸盐酸盐)、硫乙醇酸钠(或硫乙醇酸)、琼脂以及刃天青等。这些成分在培养基中发挥着各自的作用:
胰酪蛋白胨和酵母浸出粉提供氮源以及合成蛋白质所需的各种氨基酸和生长因子。
葡萄糖作为碳源及能源,支持微生物的生长和代谢。
氯化钠维持培养基的均衡渗透压,确保微生物的正常生长。
L-胱氨酸、硫乙醇酸盐和葡萄糖共同降低氧化还原电位,防止过氧化物的积累对某些菌产生毒性,有利于厌氧菌的生长。
琼脂作为凝固剂,减少液体对流,有利于厌氧环境的形成。
刃天青作为氧化还原指示剂,其颜色变化可以反映培养基的氧化还原状态。
二、用途
硫乙醇酸盐培养基主要用于培养需氧、厌氧和微需氧微生物,是培养厌氧菌的首选培养基。在药典中,它一直被用作无菌检查培养基,对于检测无菌药品、生物制品、医疗器械、原料、辅料等的无菌状态具有重要意义。此外,根据GB4789.13-2012规定,它还可用于食品微生物检测中产气荚膜梭菌的厌氧培养。
三、特点
营养丰富:含有较全面的营养成分,能满足绝大多数细菌的营养需求。
梯度环境:培养基的不同深度可以分别模拟提供有氧、弱氧至无氧不同氧含量的梯度环境,使厌氧细菌、兼性厌氧细菌、好氧菌均可在此培养基中生长。
稳定性好:由于含有琼脂和还原性物质,可以稳定地保持厌氧环境,无需借助额外的设备即可达到良好的培养效果。
四、使用方法
配制:称取适量的培养基粉末,加入纯化水,加热煮沸使其完全溶解,摇匀后分装至无菌容器中。
灭菌:将分装好的培养基进行高压蒸汽灭菌,灭菌条件通常为121℃、15分钟。
接种:在无菌条件下,将待检测的样本接种至培养基中,然后进行培养。
观察:根据实验需求,观察并记录微生物的生长情况。
五、注意事项
培养基的氧化层要求:在接种前,培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/3(或1/5,根据具体规定而定)。否则,需进行水浴加热至粉红色消失,并迅速冷却。
避免摇晃:培养基在灭菌后至使用过程中应避免摇晃,以免培养基因振动而进入氧气,影响培养基的使用。
接种操作:接种操作应动作迅速、敏捷,以减少培养基与空气的接触时间,防止培养基被氧化。
刃天青的新鲜度:刃天青应以新鲜配制为准,否则可能影响判断结果。
培养条件:根据实验需求选择合适的培养温度和时间。
综上所述,硫乙醇酸盐培养基是一种营养丰富、用途广泛、稳定性好的微生物培养基,特别适用于厌氧菌的培养。在使用时,需要注意培养基的氧化层要求、避免摇晃、接种操作以及刃天青的新鲜度等问题。
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