拥有300多年历史的默克公司,作为较早进入色谱产品研究和生产的厂家,从1969年推出色谱柱产品以来,一直不断推陈出新。不仅如此,随着对Sigma-Aldrich®的收购,强强联手,默克现拥有丰富的液相色谱柱产品,每个系列色谱柱各具特色。
Supelco®液相色谱柱全产线
Supel™ Carbon系列是一款新型石墨化碳基质的色谱柱,填充单分散全多孔石墨化碳填料,采用石墨极性保留效应(PREG)机理,允许反相条件下,提高极性和带电化合物的保留,有助于几何异构体分离。色谱柱粒径2.7 µm,孔径200 Å,比表面积155 m2/g,可与任意溶剂兼容,pH耐受范围宽1-14,耐温上限250摄氏度,耐压上限700bar,适于U/HPLC分析。
此前,我们分享了如何采用Supel™ Carbon液相色谱柱对维生素D2/D3代谢物和 苯甲酸异构体进行分析。那除此之外,Supel™ Carbon还能分析哪些化合物呢?本期就为大家揭晓其在核苷、氨基酸分析中的广泛应用。
应用案例1:非衍生法检测12种核苷类化合物
核苷类化合物是核酸的组成部分、抗逆转录病药物的活性药物成分、某些疾病的生物标记物,结构相近,极性非常大,在常规反相色谱柱上很难保留,给检测带来很大挑战。在非衍生条件下,采用新型石墨化碳基质的Supel™ Carbon系列色谱柱可同时识别12种核苷化合物,为客户提供更好的分析方法。
序号 | 化合物名 | 保留时间 (min) |
1 | ß-假尿苷 (25 µg/mL) | 5.346 |
2 | 3-甲基胞苷甲基硫酸酯 (100 µg/mL) | 5.791 |
3 | 胞嘧啶核苷 (50 µg/mL) | 5.982 |
4 | 尿嘧啶核苷 (25 µg/mL) | 7.328 |
5 | 2'-O-甲氧基胞苷 (20 µg/mL) | 8.283 |
6 | 5-甲基胞苷 (100 µg/mL) | 9.307 |
7 | 1-甲基腺苷 (25 µg/mL) | 9.530 |
8 | 5-甲基尿苷 (50 µg/mL) | 11.641 |
9 | 肌苷 (25 µg/mL) | 12.130 |
10 | 7-甲基鸟苷 (25 µg/mL) | 12.725 |
11 | 2-硫代胞苷 (10 µg/mL) | 13.571 |
12 | 鸟苷 (25 µg/mL) | 14.203 |
应用案例2:非衍生法检测17种氨基酸:
氨基酸在常规反相色谱柱上很难保留,分子中大部分取代基团无紫外吸收,因此对氨基酸分析存在巨大挑战。常用的分析方法是将氨基酸衍生后进行分离,但检测结果受衍生过程、样品基质影响较大。采用新型石墨化碳基质的Supel™ Carbon系列色谱柱,在非衍生条件下,可同时识别17种氨基酸,提高柱寿命,降低客户分析成本。
分析物:1甘氨酸 (GLY)、2丝氨酸 (SER)、3丙氨酸 (ALA)、4苏氨酸 (THR)、5天冬酰胺 (ASN)、6半胱氨酸 (CYS)、7天冬氨酸 (ASP)、8脯氨酸 (PRO)、9谷氨酰胺 (GLN)、10谷氨酸 (GLU)、11缬氨酸 (VAL)、12赖氨酸 (LYS)、13亮氨酸 (LEU)、14甲硫氨酸 (MET)、15异亮氨酸 (ILE)、16组氨酸 (HIS)、17精氨酸 (ARG)